■克隆名稱(chēng)
rTaq+(10E9/14G9)
■產(chǎn)品說(shuō)明
本制品是抗Taq單克隆抗體和TAKARA公司rTaq酶的混合制品,適用于Hot StartPCR高溫加熱前,抗Taq單克隆抗體與Taq酶結合,抑制聚合酶活性,從而抑制低溫條件下由引物的非特異性退火或引物二聚體引起的非特意性擴增??筎aq單克隆抗體在PCR反應最初的DNA變性步驟已變性,因此無(wú)需特殊失活處理,在常規PCR反應條件下即可使用。使用本試劑擴增得到的PCR產(chǎn)物的3’末端附有一個(gè)“A”堿基,可直接用于TA克隆。
■來(lái)源
E.coli 重組蛋白,鼠源抗體。
■活性單位
2.5U/uL
■品質(zhì)保證
酶純度檢測>99%,無(wú)核酸內切、外切酶活性,也無(wú)核酸污染,抗體純度>95%。
■應用范圍
RT-PCR、Hot Start PCR法擴增DNA、對流PCR。
■PCR性能
以λDNA為模板可以很好地擴增10kb的DNA片段。
50℃條件下反應1小時(shí),抗體對聚合酶活性抑制效率達90%以上
■反應緩沖液
請使用隨酶提供的10×PCR Buffer
■保存條件
-20 ℃
■PCR體系
同TAKARA公司商品化酶rTaq。
■PCR條件
94℃ 5 min
94℃ 30 sec
Tm 30 sec 25 cycles
72℃ 1kb/min
72℃ 10 min(Gibson組裝用片段擴增請去掉此步)
10℃ hold
■備注
2013年9月份作品,團隊成員精心設計篩選出的單克隆抗體,純度高,親和力強于TAKARA公司Anti-Taq抗體2倍,60℃以下抑制效果非常好,請放心使用。